作者:西安博爾 發(fā)布日期: 2021-03-16 瀏覽量:
核酸檢測實驗室內要靠高投入采購高品質的試劑和儀器來提高檢測的靈敏度,但是當檢測量非常大的時候,誰也不能保證百分之百不出問題。核酸檢測實驗室準確的核心應該是人和嚴格的試驗流程和管理制度。我們能做的是隨時保持警惕,盡早發(fā)現(xiàn),及時處置,最大程度減少損失。核酸檢測實驗室發(fā)生污染如何緊急處理呢?下面博爾實驗室小編根據實驗室工作人員的一次親身經歷來為大家解答。
實驗員發(fā)現(xiàn)在一次qPCR實驗中雖然陰性對照成立,但是4份陰性樣品出現(xiàn)了擴增曲線??梢源_定實驗中發(fā)生了污染,但是從何時開始污染的?污染源是什么?影響到的試驗有多少?這個時候我們需要一一排查,實驗室一旦發(fā)生污染,第一時間不是糾結于到底哪里污染了,到底誰的責任導致的污染。絕大多數時間我們無法確定污染源,更不能輕易排除一項污染源。而是第一時間果斷采取清除污染的措施。做好如下工作:
1.停止所有實驗活動,查看當天所有的試驗結果,發(fā)現(xiàn)只有一個實驗受到了污染。
2.清理試劑準備區(qū)、核樣本制備區(qū)和擴增區(qū)所有開封的試劑耗材;
3.離心管架、試管架等可重復使用的物品浸泡到84消毒液中過夜,第二天用清水清洗后晾干使用;
4.對移液器內外表面、核酸提取儀內部先用酒精擦拭后,再用核酸去除劑擦拭,同時啟用備用的移液器;
5.對各區(qū)的生物安全柜、潔凈工作臺和實驗臺面先用酒精擦拭后,再用核酸去除劑擦拭;
6.對實驗室地面用84消毒液進行清潔;
7.開窗通風。
污染清除的實驗驗證
1.在試劑準備區(qū)的潔凈工作臺面、樣本制備區(qū)的生物安全柜內部、核酸提取儀內部和擴增區(qū)臺面分別放置開蓋裝有PBS的離心管,過夜;
2.用采樣拭子蘸PBS后對實驗臺面、生物安全柜臺面和潔凈工作臺面反復擦拭后,放入PBS中進行洗脫。
3.用采樣拭子蘸PBS后對移液器的內外表面進行取樣,取樣后放入PBS中進行洗脫。
4.將配液的移液器和加模板的移液器換上無濾芯槍頭,在PBS中反復吹吸10次,測試移液器內部是否存在污染。
5.測試結果
5.1測試結果發(fā)現(xiàn)樣本制備區(qū)的生物安全柜內加模板的移液器內外表面擦拭拭子為核酸陽性,其他檢測都是陰性。
5.2對樣本制備區(qū)的生物安全柜內加模板的移液器進行清潔和擦拭后,第二天對該移液器內表面和外表面擦拭拭子進行檢測,仍有擴增分別為39.89和39.63。
5.3對樣本制備區(qū)的生物安全柜內加模板的移液器進行清潔和擦拭后,過二天后對該移液器內表面和外表面擦拭拭子進行檢測,檢測結果為陰性。
持續(xù)監(jiān)測
本次實驗室污染事件發(fā)現(xiàn)到針對性解決,一共用時五天。最終可以確定是樣本制備區(qū)的生物安全柜內加模板的移液器發(fā)生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多,移液器是否是唯一的污染因素我們很難確定。后續(xù)的幾天仍然在檢測中增加陰性對照,持續(xù)對環(huán)境等樣品進行監(jiān)測,確保污染被徹底清除。
很多檢測實驗室被持續(xù)的不定期核酸污染所困擾,很重要的原因是未能及時發(fā)現(xiàn)污染并在第一時間徹底的處理。每個實驗室都應該結合自己實驗室的情況建立規(guī)范的污染處置規(guī)程,確保在下一次污染發(fā)生時能盡早盡快解決。